Новосибирский государственный аграрный университет
Сибирский научно-исследовательский институт защиты растений
ОТЧЕТ
об исследовательской работе по теме:
«Изучение фунгицидного действия Стимулина»
Исполнитель:
профессор кафедры агроэкологии,
д.б.н.
______________Л.Н. Коробова
Новосибирск, 2014
Целью данной работы стало изучение влияния Стимулина на микроскопические грибы, возбудители семенных инфекций яровой пшеницы и ячменя.
Задачи исследования:
- выделить штаммы возбудителей (со средней или сильной степенью патогенности) из семенного материала;
- изучить фунгицидную активность Стимулина по отношению к Bipolaris sorokiniana Shoem., возбудителю корневой гнили, а также темно-бурой пятнистости листьев и «черного зародыша» семян;
- оценить реакцию на Стимулин фитопатогена Fusarium оxysporum Schlecht, возбудителя корневой гнили;
- изучить активность препарата по отношению к условно патогенному грибу, возбудителю «черного зародыша» семян, Alternaria alternata (Fr.) Keissl.
Фунгицидную активность препарата анализировали в лабораторных опытах (in vitro) на штаммах тех возбудителей, которые всегда заселяют зерновки яровых злаков. Для культивирования штаммов использовали агар Чапека-Докса, куда добавляли Стимулин. Действие препарата оценили в 2 концентрациях: соответствующей заявленной производителем и превышенной в 2 раза.
Возбудители были выделены методом микологического анализа (по Наумовой) из пораженного зерна яровой пшеницы сортов Новосибирская 31 и Новосибирская 29 и ячменя Арна, после чего была проверена их патогенность. Для оценки антигрибной активности Стимулина были отобраны пшеничные штаммы B. sorokiniana и F. оxysporum с умеренно высокой и высокой агрессивностью, и ячменный штамм A. alternata со средней агрессивностью.
После пересева штаммов в шестикратной повторности на среду Чапека (с введенной концентрацией Стимулина и контроль) в динамике через 3, 6 и 10 суток измеряли диаметр растущих колоний и учитывали активность спороношения.
Фунгицидная активность Стимулина по отношению к темноцветному грибу B. sorokiniana, возбудителю корневой гнили и темно-бурой пятнистости, оказалась высокой. Начальную скорость развития гриба препарат ограничил более чем в 3 раза (рис. 1, учет через 3 суток).
В то же время, фунгицидная активность Стимулина по отношению к F. оxysporum, возбудителю корневой гнили оказалась невысокой. Стимулин совсем не ограничивал начальную скорость роста колонии, но изменял морфологию развивающегося гриба (рис. 3, табл. 1).
В контроле воздушный мицелий штаммов F. оxysporum и строма (мицелий, погруженный в питательный агар) имели желтоватый оттенок. Под влиянием Стимулина строма и воздушный мицелий гриба становились абсолютно белыми.
Мицелий гриба контроля был более пушистым, а на фоне Стимулина как бы «прилипал» к субстрату (рис. 4). При этом испытываемый препарат ограничивал примерно на треть конидиальное спороношение F. оxysporum, что выразилось в уменьшении числа как макро, так и и микроконидий.
Увеличение концентрации Стимулина в 2 раза не привело к изменению скорости роста гиф F. оxysporum. При этом произошло ожидаемое снижение всхожести семян яровой пшеницы.
Рис. 1 Действие Стимулина на начальный рост колоний B. sorokiniana
Стимулин продолжал сдерживать вершинный рост гиф B. sorokiniana и в дальнейшем (табл. 1), что выразилось в уменьшении диаметра его колоний к 10 дню учета более чем в 4,5 раза. Кроме падения скорости роста возбудителя, на фоне Стимулина было отмечено резкое снижение спороношения B. sorokiniana, что проявилось в изменении темного цвета центральной части колоний и в полном отсутствии конидий на их периферии (рис. 2):
Рис. 2 Действие Стимулина на рост и спороношение B. sorokiniana (учет через 10 суток)
В отношении еще одного темноцветного, микроскопического гриба Alternaria alternatа (условно патогенного) антигрибная активность препарата Стимулин тоже оказалась сравнительно высокой. Препарат ограничивал рост колонии (табл. 1) и образование спор бесполого спороношения.Таблица 1 − Антигрибная активность Стимулина по отношению к вирулентным штаммам возбудителей болезней зерновых культур, передающимся с семенами
| Вариант | Диаметр колоний на 6 сутки | |||||
| Bipolaris sorokiniana | Fusarium оxysporum | Alternaria alternatа | ||||
| см | % от контроля | см | % от контроля | см | % от контроля | |
| Контроль (среда ЧДА) | 8, 2 | – | 8,0 | – | 4,5 | – |
| Стимулин | 2,9 | 35,4 | 8,2 | 100 | 2,0 | 44,4 |
| НСР 05 | 1,96 | |||||
Рис. 3 Действие Стимулина на начальный рост колоний F. оxysporum (учет через 3 суток)
Рис. 4 Действие Стимулина на рост и спороношение F. оxysporum через 10 суток
В целом результаты скрининга показали, что у темноцветных грибов B. sorokiniaи A. alternatа Стимулин в рекомендуемой концентрации не менее чем наполовину снижает скорость прироста колоний и ингибирует спороношение. По отношению к фузариям Стимулин проявляет слабовыраженные фунгицидные свойства, ограничивая лишь частично спороношение. Можно предположить, что механизм фунгицидной активности Стимулина связан с подавлением синтеза пигмента меланина, имеющего фенольную природу и защищающего спору темноцветных возбудителей от неблагоприятного действия окружающей среды.